4.5.6 结果计算
同3.5.4。
4.6 空白实验
除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。
4.7 方法定量限
本方法的定量限为0.01 mg/kg。
4.8 回收率
在添加浓度0.01 mg/kg～0.5 mg/kg浓度范围内，回收率在80%～110%之间，相对标准偏差小于10%。
4.9 允许差
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的15%。
5 第三法气相色谱-质谱联用法（GC-MS和GC-MS/MS）
5.1 原理
试样经超声提取、固相萃取净化后，进行硅烷化衍生，衍生产物采用选择离子监测质谱扫描模式
（SIM）或多反应监测质谱扫描模式（MRM），用化合物的保留时间和质谱碎片的丰度比定性，外标法定量。
5.2 试剂与材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。
5.2.1 吡啶：优级纯。
5.2.2 乙酸铅。
5.2.3 衍生化试剂：N,O-双三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）＋三甲基氯硅烷（TMCS）（99＋1），色谱纯。
5.2.4 乙酸铅溶液（22 g/L）：取22 g 乙酸铅用约300 mL 水溶解后定容至1 L。
5.2.5 三聚氰胺标准溶液：准确吸取三聚氰胺标准储备液（3.2.12）1 mL 于100 mL 容量瓶中，用甲醇定容至刻度，此标准溶液1 mL 相当于10 μg 三聚氰胺标准品，于4℃冰箱内储存，有效期3 个月。
5.2.6 氩气：纯度大于等于99.999％。
5.2.7 氦气：纯度大于等于99.999％。
5.2.8 其他同3.2。
5.3 仪器和设备
5.3.1 气相色谱-质谱（GC-MS）仪：配有电子轰击电离离子源（EI）。
5.3.2 气相色谱-质谱/质谱（GC-MS/MS）仪：配有电子轰击电离离子源（EI）。
5.3.3 电子恒温箱。
5.3.4 其他同3.3。
5.4 样品处理
5.4.1 GC-MS法
5.4.1.1 提取
5.4.1.1.1 液态奶、奶粉、酸奶和奶糖等
称取5 g（精确至0.01 g）样品于50 mL具塞比色管，加入25 mL三氯乙酸溶液（3.2.8），涡漩振荡30 s，再加入15 mL三氯乙酸溶液，超声提取15 min，加入2 mL乙酸铅溶液（5.2.4），用三氯乙酸溶液定容至刻度。充分混匀后，转移上层提取液约30 mL至50 mL离心试管，以不低于4000 r/min离心10 min。上清液待净化。
5.4.1.1.2 奶酪、奶油和巧克力等
称取5 g（精确至0.01g）样品于50 mL具塞比色管中，用5 mL热水溶解（必要时可适当加热），再加入20 mL三氯乙酸溶液（3.2.8），涡漩振荡30 s，再加入15 mL三氯乙酸溶液超声提取及以下操作同
5.4.1.1.1。若样品中脂肪含量较高，可以先用乙醚脱脂后再用三氯乙酸溶液提取。
5.4.1.2 净化准确移取5 mL的待净化滤液至固相萃取柱（3.2.13）中。再用3 mL水、3 mL甲醇淋洗，弃淋洗液，
抽近干后用3 mL氨化甲醇溶液（3.2.9）洗脱，收集洗脱液，50℃下氮气吹干。
5.4.2 GC-MS/MS法
5.4.2.1 奶粉、奶酪、奶油、巧克力和奶糖等
称取0.5 g（精确至0.01 g）试样，加入5 mL甲醇水溶液（3.2.7），涡旋混匀2 min后，超声提取15 min ~20
min，以不低于4000 r/min离心10 min，取上清液200 μL用微孔滤膜（3.2.16）过滤，50℃下氮气吹干。
5.4.2.2 液态奶和酸奶等
称取1 g（精确至0.01 g）试样，加入5 mL甲醇，涡旋混匀2 min后，超声提取及以下操作同5.4.2.1。
5.4.3 衍生化
取上述氮气吹干残留物，加入600 μL的吡啶和200 μL衍生化试剂（5.2.3），混匀，70℃反应30 min后，供GC-MS或GC-MS/MS法定量检测或确证。
|
