本月16日,国家畜禽分子遗传育种中心宣布,世界首例体细胞克隆兔在北京诞生。这只小兔目前健康状况良好,体重已经达到了2公斤。从此克隆家族又添新丁,针对人类疾病的治疗又增添了一份新生力量。
体细胞克隆一向被视为克隆技术的一大“门槛”,当年“多利”从成年母羊乳腺细胞克隆成功后,轰动了世界。克隆兔虽然一直有科学家在研究,但这次诞生在北京的却是全球第一只体细胞克隆兔,可谓“世界最牛”!
另外,由于克隆兔子比克隆其他哺乳动物的难度要大得多,因此这只雪白天使的降临就显得尤其神秘。为了揭开北京克隆兔诞生之谜,记者采访了负责此项目的国家畜禽分子遗传育种中心博士后李善刚教授。
5个多月前的一个下午,国家畜禽分子遗传育种中心博士后李善刚和克隆兔课题小组的四五个实验人员用不到15分钟的时间就完成了当天的实验任务———把培育好的卵细胞注入一只雪白的母兔体内。
当时,他并没有想到自己手中这只母兔和其他同伴会有什么不同。因为此前已有10批同样的兔子做了“代理妈妈”的手术,但并没有成功诞下兔宝宝。可是32天后,一只克隆兔宝宝凌空出世,活蹦乱跳地出现在了李善刚的面前。
5个月后,7月18日,这只已经发育成熟的小母兔“告诉”世界,首只体细胞克隆兔在北京成功诞生并存活。目前,它已经被列入了生殖计划,也就是说,它将与其他公兔交配,准备“做妈妈”。
小白兔,从来都是无辜和柔弱的代言。但是在2002年法国克隆兔成功之后,更多的人才知道,原来兔子身上也蕴藏着巨大的能量———它具有跟人类更相近的基因密码。从进化的角度说,小白兔比小白鼠更接近灵长类。因此兔子在生理上和人更接近。
如果针对兔子的特定基因进行实验,就可能找到研究人类疾病的致病机理和寻找有效的治疗办法。特别是对于研究心血管疾病和眼科疾病,以及一些遗传疾病就更需要兔子“帮忙”。
北京克隆兔虽然意义重大,但是现在最让科研人员欣慰的说法却是:“把它扔在家兔群中,根本分辨不出它是只克隆兔,和其他兔子看来都一样。”这说明克隆兔和母体相似度非常高,真是越普通越可贵。但即使克隆这样一只“普通”小兔,也是几经周折。
克隆兔来自“母亲”后背,是世界首例成功的用体细胞进行克隆的兔子
从身体的一个部位“诞生”,这似乎是只有在希腊神话中才有的情节。战神雅典娜从父亲宙斯的头部跳出来,颇有些大逆不道的意味。而北京克隆兔的来源更是奇怪,它居然是一只胎儿小兔的背部细胞。
克隆兔子的关键,一是将从动物身体中取出的经过处理的细胞核,根据细胞周期的变化植入去核卵细胞,二是将如此得到的转基因卵子适时植入代孕母兔的子宫。但是,由于兔子卵的存活时间非常难以掌握,而且细胞透明带韧性强,在克隆过程中,想用吸针穿破它,吸取、去除细胞核十分不易。而如果细胞核去除不净,克隆就会失败。因此克隆兔子比克隆其他哺乳动物的难度要大得多。
在北京的国家畜禽分子遗传育种中心克隆兔诞生之前,法国是首次成功的将克隆技术应用于兔子身上的国家。只不过,2002年3月法国科学家是成功克隆了乳汁中含有治疗蛋白的4只转基因兔,其中2只通过自然方式繁殖了后代。
就在法国成功培育克隆兔后的1个月,广西首例克隆兔在广西大学动物繁殖研究所顺利诞生。他采用的技术是把一只兔子早期胚胎细胞中的遗传物质,注入另一只兔子的已经被抽取了遗传物质的卵细胞中,等这个具有新的遗传物质但未经受精的卵细胞发育成胚胎后,再把它植入第三只兔子的输卵管或子宫内。而这次李善刚博士带领的课题组则是从胎兔后背的细胞中提取了遗传物质进行培养,也就是世界首例成功的用体细胞进行克隆的兔子。
李善刚博士首先选择了尚在胎儿状态的实验兔,这种小兔的怀孕周期是20天。从胎儿兔的背部皮肤上剪取体细胞进行培养。再对养成的细胞进行血清饥饿处理,提取携带遗传物质的细胞核注入另一个去核的兔卵母细胞。
然后还需要进行电融合。这是因为电脉冲会促使形成融合细胞,而且还可以产生类似于自然受精过程中的一系列反应,使融合细胞也能像受精卵一样进行细胞分裂、分化。
等新的胚胎培养成4个细胞胚胎后,再移入“代理妈妈”体内,经过28到32天的孕育,妊娠到期后,对母兔进行剖腹产,就可以获得克隆兔了。
“刚生出来的小兔都是浑身青紫,看上去就像一团褶皱,但长大后就很漂亮了。”说到小兔的状态,李善刚教授一直很严肃的表情马上轻松下来。“现在,我们能看到的这只顺利成活的世界第一只体细胞克隆兔浑身雪白,体重已达到两公斤,和它的“代理妈妈”紧紧地靠在一起,非常健康。”
克隆兔子要先学养兔,运气有时候会和科学家开玩笑
“通过获取胎兔成纤维细胞克隆兔实验”这项已经通过分子生物学鉴定的实验早在去年12月份就开始了。而李善刚教授开始克隆兔攻关的历程却是2005年偶然开始的。
2005年,当时在读博士的他正在进行兔子干细胞的实验,一个偶然的机会,他进行了核移植的胚胎的移植工作。也就是这个偶然的机会,他进入了培育克隆兔这个领域。
“科研就是这样,你不可能知道哪个方向一定会出成绩,常常是你认为这个方向一定能做出来,反而出不来东西。”
正像李善刚说的,当他专注于克隆兔的实验后,进展并没有想象中的顺利。在实验开始之前,李善刚教授实验小组先研究并总结了近几年来的克隆技术,从生殖、病理、运用领域等方面综合分析克隆兔的研发前景。因为家兔克隆是一个世界性的难题,所以要更加精心地进行设计。
尽管如此,在实验过程中,还是难以避免的遭遇了多次失败。由于采用体细胞克隆,畸形、死胎、流产和胚胎过大等不良情况都曾遇到过,有的小兔成长发育不健全,不能正常生长,原因还在于基因的不稳定性。胎兔成纤维细胞克隆实验整整做了10次才成功,但“我对整个实验系统非常的有信心,成功只是时间和运气的问题。”
李教授笑着回忆说,曾被称为“克隆羊之父”的伊恩·威尔莫特在参观李善刚的实验室之后,留下一句“Goodluck”。“做动物实验的人都知道,有时候运气会跟你开一些玩笑。”李善刚说,“有时候做一次就能成功,有时候做十次也没有结果。”在他看来,搞科研首先要学会承受失败,虽然当打开克隆兔“代理妈妈”的肚子,如果里面空空如也,心情也会有一时的沮丧。(童岱)
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