基因编辑技术:进展与挑战

发布时间:2018-11-16 17:15:50  |  来源:中国网·中国发展门户网  |  作者:卢俊南 褚鑫 潘燕平 陈映羲 温栾 戴俊彪  |  责任编辑:赵斌宇
关键词:基因编辑,重组核酸酶,CRISPR/Cas9,DNA介导的基因编辑

重组核酸酶介导的基因编辑技术

锌指核酸酶技术

人工核酸酶技术的发展使人为定点诱导DSBs成为现实,其中锌指核酸酶技术(zinc finger nucleases,ZFNs)就是一个里程碑式的突破,也称为第一代基因编辑技术。ZFN 由锌指蛋白(zinc finger protein,ZFP)和 FokI 内切酶的核酸酶结构域组成,前者负责识别,后者负责切割 DNA。ZFP 是自然存在的蛋白结构,其由锌指结构(zinc finger,ZF)组成,ZF 能识别特定的 3 个连续碱基对(图 1a),因此可通过串联 ZF 的数量调整 ZFN 的识别特异性。FokI 通过 N 端与 ZFP 连接,由于 FokI 以二聚体的形式发挥切割作用,ZFN 使用时需要成对设计。作为新型基因编辑工具,ZFN 从 2001 年开始被陆续用于不同物种的基因编辑。

图 1 ZFN、 TALEN 及 CRISPR/Cas9基因编辑技术

a)锌指核酸酶(ZFN)基因编辑技术;(bTALEN基因编辑技术;(c)CRISPR/Cas9基因编辑技术

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